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              豬口蹄疫病毒O型抗體檢測試劑盒
              產品時間:2016-11-04
              豬口蹄疫病毒O型抗體檢測試劑盒將進一步加強人才培養、產品創新,持續不斷地提升企業核心竟爭力,實現具有高科技產業體系、知識化創業團隊的化大集團企業,更好、更快捷、更*的服務于生命科學領域,迎接新一輪世界經濟一體化所帶來的機遇與挑戰。

              豬口蹄疫病毒O型抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)使用說明書

               

              【產品名稱】
              通用名:豬口蹄疫病毒O型抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)
              英文名:Test Kit for Antibodies to Porcine Foot and Mouth Disease Virus O (ELISA)
              【包裝規格】 96T×1/盒、96T×2/盒
              【預期用途】 口蹄疫是由口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,FMDV)引起的偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病,其特征為口腔黏膜、蹄部、乳房皮膚發生水泡和爛斑。
              本試劑用于檢測豬血清中口蹄疫病毒O型抗體,可用于口蹄疫病毒O型疫苗免疫效果評價。
              【原    理】
                  本試劑盒系由預包被口蹄疫病毒O型VP1抗原的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬口蹄疫病毒O型抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經溫育后若樣品中含有豬口蹄疫病毒O型抗體,則將與酶標板上抗原結合,經洗滌除去未結合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色產物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產物變為黃色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有口蹄疫病毒O型抗體。
              【試劑盒組成】 

              序號

              名稱

              規格(96T×1)

              規格(96T×2)

              1.

              酶標板

              96T×1

              96T×2

              2.

              酶標記物  (紅蓋)

              11ml×1

              11ml×2

              3.

              抗體工作液 (藍蓋)

              5.5ml×1

              11ml×1

              4.

              20X濃縮洗滌液

              40ml×1

              40ml×1

              5.

              底物液A  (白蓋)

              6ml×1

              11ml×1

              6.

              底物液B  (黑蓋) 

              6ml×1

              11ml×1

              7.

              終止液  (黃蓋) 

              6ml×1

              11ml×1

              8.

              陽性對照  (紅蓋)

              1.0 ml×1

              1.5 ml×1

              9.

              陰性對照  (綠蓋)

              1.0 ml×1

              1.5 ml×1

              10.

              蓋板膜

              1張

              2張

              11.

              自封袋

              1個

              1個

              12.

              說明書

              1份

              1份

              【儲存及有效期】 于2~8℃避光保存,有效期為12個月。
              包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。
              【適用儀器】 含450nm、630nm波長的酶標儀,37℃恒溫設備,可調微量移液器。
              【樣品準備】
              1.取動物全血按常規方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
              2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋(如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。
              3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
              【檢驗方法】
              1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
              2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
              3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
              4.混勻,置37℃反應30分鐘。
              5.扣去孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,拍干。
              6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鐘。
              7.洗滌,同步驟5。
              8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應10分鐘。
              9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
              【參考值】 實驗正常的情況下,陰性對照≤0.10,陽性對照≥0.6。
              【檢驗結果的解釋】
              1.樣品A值≥0.25為陽性;樣品A值在0.15到0.25之間為可疑;樣品A值<0.15為陰性。
              2.本實驗結果為陰性或可疑時表明豬只抗體水平不足,建議補打相應疫苗。
              【試驗方法的局限性】
                  該試驗僅作為定性檢測豬血清、血漿中豬口蹄疫病毒O型抗體,根據A值高低可作抗體水平強、中、弱的粗略評估。
              【注意事項】
              1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣,嚴格健全和執行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應按傳染物處理。
              2.終止液具有腐蝕性,應避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
              3.酶標板從冷藏環境中取出時應恢復至室溫方可開袋,未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
              4.濃縮洗滌液在低溫時容易結晶,使用時需恢復至室溫以完全溶解。
              5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
              6.用于檢測的樣品應保持新鮮。
              7.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數為準。
              8.不同批號試劑組分不得混用。

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